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生胚速冻技术原理

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生胚速冻技术原理

原理:胚胎水分含量高游离水易形成冰晶,胞内冰晶可破坏Pr的硫氢键,发生不可逆的变化,导致cell死亡,因此其原理是防止生成大量冰晶对cell造成伤害。

胚胎虽然可以在低温下实现长期保存,但如果操作不当,在胚胎或配合子的冷冻过程中也会造成许多低温损伤。第一种损伤因素是溶液损伤,由于冷却速率过慢,胞外溶液中水分大量结冰,溶液浓度提高,胞内水分大量渗出,导致细胞的强烈收缩和细胞处于高浓度的溶液中时间过长,从而造成细胞损伤。第二种损伤因素是胞内冰晶损伤,由于冷却速率过快,胞内水分来不及通过细胞膜向外渗出,胞内溶液过冷而结冰,从而造成细胞损伤。相应地,在解冻/复温的过程中,如果复温速率不当,即使胚胎在冷却时没有遭受致命的损伤,也会因为在温度较高区域的时间过长,即复温过慢,引起胞内再结晶而造成细胞或胚胎的致命损伤。此外,低温保护剂的加入或去除不当,会引起明显的渗透压的变化而且,细胞内外的电解质浓度改变也是影响胚胎低温保存的关键因素。

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